横向流量提示，技巧和常见问题解答（FAQ）

金纳米壳如何增加横向流动的敏感性？
我们的150 nm金纳米壳的每个颗粒比侧向流动中使用的传统40 nm金明显亮30倍。因为它们是用二氧化硅核制成的，所以它们的密度仅为150 nm固态金颗粒的一半，并且很容易流过硝酸纤维素膜。重要的是要注意，对于每体积的任何OD，纳米壳的颗粒数要少大约30倍，因此需要适当调整共轭物的体积，以使结合事件最大化。首先，将每条带的OD或结合物体积增加两倍，可以提高灵敏度。

您提供的颗粒表面（柠檬酸盐，羧基）之间有什么区别？
柠檬酸盐分子容易被其他分子或配体（例如具有末端胺或巯基的分子）取代。因此，该表面对于被动结合抗体至纳米颗粒表面是理想的。柠檬酸盐提供负的ζ电势，以稳定纳米粒子在水性溶剂和低渗透压缓冲液中。

我们的羧基官能化纳米颗粒提供了高度带负电荷的表面和进一步处理的化学手感。羧基表面可用于将分子与游离胺（例如抗体）共价结合到纳米颗粒的表面。酸表面和游离胺之间的酰胺键是使用EDC / NHS化学方法形成的。

如何确定被动或共价结合最适合我的检测？
在确定被动吸附是否适合您的测定时，需要考虑许多重要的考虑因素。快速和容易的共轭是优先考虑的，而被动式可能更可取。也就是说，结合过程确实需要优化，因此相对于共价方法，可能需要更多的前期工作才能获得稳定的结合物。被动吸附通常会导致高的抗体负载在颗粒表面，这对于最大化灵敏度非常有用。

另一方面，共价结合可能需要较少的抗体，并且如果您的蛋白质过于昂贵，最终可以为您省钱。 相对于被动吸附，共价结合物可在困难的样品基质和苛刻的缓冲条件（高盐或去污剂浓度）中提供更高的稳定性。稳定且可重现的共价结合物可对分析物进行可靠的定量，并且 可以精确控制抗体与颗粒的比率，这对于在竞争分析中调整动态范围以及优化使用具有变化结合动力学的抗体时的灵敏度至关重要。

羧基纳米颗粒比NHS纳米颗粒有什么优势？
NHS纳米颗粒是快速评估抗体对的绝佳工具-特别是对于小规模的“概念验证”研究，或者在侧向流动中，在横向流动中，为了模拟合适的动力学条件而在条带上配对抗体至关重要。但是，NHS纳米粒子受到规模的限制。半稳定的NHS-酯部分在水中水解。我们依靠颗粒的快速冻干来“固定” NHS酯反应性。用大量材料执行此过程会减慢该过程，并减少粒子表面上活性NHS酯的量。

您的颗粒能耐受DMSO或吐温等清洁剂吗？
制备共价结合物后，它们对几乎所有生物结合应用中常用的洗涤剂和聚合物都非常稳定。对于共价结合物，浓度最高为1％的去污剂通常比较好，这要比被动结合的金通常所能耐受的要高。

您的颗粒盐稳定吗？
未结合的金纳米颗粒不是盐稳定的，但是在成功结合之后，结合物通常在1X PBS中稳定，并且一些客户观察到在高得多的盐浓度下具有稳定性。如果您的应用需要高盐环境，我们建议您以低盐浓度制备偶联物，然后添加额外的盐并通过UV-VIS监测偶联物。光学密度的峰值和下降的变宽表明不稳定。